組織學是一個術語，指的是組織和細胞的微觀解剖學研究。正確的光學顯微鏡組織學樣品制備對于從組織樣品中獲得高質量結果至關重要。

幾乎所有組織學程序共有3個主要步驟。shou先，固定樣品，以保護組織并減緩組織降解。接下來，將樣品浸入具有與其自身相似的機械性能的材料或包埋介質中。包埋后，使用稱為切片機的精密切割工具將樣品切成薄片或切成薄片。該視頻介紹了這些常規步驟以及與之相關的一些概念。

組織固定是保存細胞和組織成分并維持其結構的關鍵步驟。細胞死亡后，天然存在的酶從細胞器中釋放出來，并開始降解整個細胞和細胞外基質中的蛋白質，從而破壞了細胞的結構。固定通過直接抑制這些酶消化蛋白質的能力和使酶切位點無法識別來防止這種降解。

固定的兩個主要機制是交聯和凝結。交聯涉及蛋白質內部以及蛋白質之間的共價鍵形成，這會導致組織變硬并因此抵抗降解。凝結是由于使用酒精或丙酮使蛋白質脫水而引起的，這會使蛋白質的三級結構變形，從而使疏水或擔心水的區域移動蛋白質表面。凝結性固定可以幫助包埋石蠟等介質穿透組織。

zui常用的固定劑之一是福爾馬林，它是溶于水中的甲醛。在固定過程中，甲醛附著在伯胺上，例如在賴氨酸和谷氨酰胺氨基酸側鏈上發現的那些，形成穩定的交聯鍵，稱為甲苯橋。此過程本質上很慢，zui多可能需要1-2天。

固定之前，應考慮一些注意事項。shou先，考慮樣品的擴散率。固定劑將以與固定劑的擴散系數乘以時間平方根相關的速率在組織中擴散一定距離。固定劑需要1個小時才能穿透1毫米到樣品中，將花費25個小時才能穿透5毫米。一旦福爾馬林到達組織中心，就需要發生交聯反應基石。因此，為了在合理的時間內徹底固定樣品，樣品的厚度應限制為4 mm。

其次，考慮固定劑的體積和pH值。固定劑與樣品的體積比應至少為40：1，以使試劑不會隨時間流逝。盡管某些固定劑的設計目的是在酸性pH值下工作，但福爾馬林在磷酸鹽緩沖液中保持中性pH值時效果zui佳，因此不會產生過多的酸，從而在組織中造成假象。

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